Bukti struktur jaringan, antibodi dan patogen melalui label imun sangat populer, modern dan akurat. Imunofluoresensi mengacu pada pelabelan kekebalan dengan antibodi fluoresen yang disiapkan dan dibuat untuk bersinar di bawah sinar UV.
Pada Deteksi imunofluoresensi langsung substrat diperiksa langsung dengan antibodi bercahaya, tanpa antibodi primer atau antigen buatan.
Apa itu deteksi imunofluoresensi langsung?
Deteksi imunofluoresensi langsung adalah metode diagnostik yang didasarkan pada pengetahuan imunologi, imunostaining dan imunohistokimia. Fokusnya di sini adalah pada kemampuan antibodi untuk mengikat titik-titik tertentu dalam jaringan atau antigen dalam serum. Tempat-tempat ini adalah epitop.
Dalam diagnostik biokimia, terdapat antibodi atau mimetik buatan (tunggal: mimetik) yang memungkinkan ikatan antibodi-antigen ini ditandai dengan fluoresensi atau radioaktivitas. Konjugat antibodi buatan mengikat di satu sisi ke epitop dan di sisi lain memiliki penanda fluoresen dalam kasus imunofluoresensi. Ini adalah alternatif untuk menggunakan penanda radioaktif. Hal yang istimewa tentang deteksi langsung imunofluoresensi dibandingkan dengan deteksi tidak langsung adalah bahwa antibodi yang mengikat epitop antigen pada bahan yang diperiksa juga mewakili konjugasi antibodi dengan penanda fluoresen. Antibodi tambahan tidak diperlukan untuk deteksi langsung.
Fluorescein, yang bersinar di bawah sinar UV, dan fluorescein isothiocyanate (FITC) digunakan sebagai pewarna untuk membuat konjugasi antibodi buatan dalam imunofluoresensi. Sejauh ini terbaca agak rumit, tetapi deteksi imunofluoresensi langsung adalah metode diagnostik laboratorium medis standar untuk berbagai macam pertanyaan medis. Antibodi dengan pewarna fluoresen siap dijual.
Fungsi, efek & tujuan
Deteksi langsung imunofluoresensi tersedia untuk pemeriksaan jaringan untuk pewarnaan struktur tertentu dalam jaringan. Tetapi mereka juga tersedia untuk sel tunggal. Sitometri aliran memainkan peran utama di sini. Terakhir, ada imunassay fase padat dan cair. Pemeriksaan imunofluoresensi jaringan sangat penting dalam onkologi, yaitu perawatan medis untuk penyakit kanker.
Antigen spesifik tumor dalam jaringan tumor dapat dideteksi secara langsung dengan imunofluoresensi. Pemeriksaan sampel jaringan dari tumor ini sering kali penting untuk mengetahui dari mana metastasis yang ada berasal di dalam tubuh, atau untuk membuat penilaian apakah tumor itu jinak atau ganas. Pemeriksaan sel individu dengan deteksi imunofluoresensi langsung digunakan untuk menemukan antigen virus, antigen bakteri dan epitop lainnya.
Misalnya, Anda dapat mengetahui apakah sel terinfeksi oleh virus dan pada tahap siklus infeksi apa sel tersebut berada. Nama FACS (= Fluorescence-Activated Cell Sorting) adalah metode aliran sitometri yang sangat efisien di mana sel-sel yang ditandai dengan fluoresensi didistribusikan ke tabung reaksi yang berbeda tergantung pada jenis warnanya. Prosedur ini penting dalam imunologi, hematologi, dan penyakit menular.
Immunofluorescence immunassay memungkinkan deteksi langsung dari racun lingkungan, organisme hasil rekayasa genetika, dan zat aditif tertentu dalam makanan. Dalam pengaturan eksperimental ini selalu ada fase padat dan cair. Berbagai patogen, termasuk virus HIV penyebab AIDS, juga dapat dideteksi secara langsung. Namun, saat mendeteksi penyakit menular dan autoimun, yang sering menjadi masalah adalah mendeteksi antibodi daripada antigen. Ini adalah molekul pertahanan yang dibentuk oleh sistem kekebalan tubuh. Menurut definisi yang disajikan di sini, bukti semacam itu bukanlah bukti langsung, karena antibodi fluoresen tidak langsung berpasangan dengan antigen tubuh sendiri, tetapi dengan antigen pengaturan pengujian.
Antigen-antigen ini dalam pengaturan eksperimental pada gilirannya terkait dengan antibodi tubuh sendiri. Deteksi langsung imunofluoresensi untuk infeksi umum, misalnya virus HIV dan klamidia, hanya digunakan dalam deteksi khusus dan tes konfirmasi. Ada tes untuk lebih banyak penyakit. Dalam kebanyakan situasi, deteksi antibodi tidak langsung lebih cocok untuk penyakit menular, karena sistem kekebalan tubuh sendiri memiliki kemampuan cerdik untuk mengingat infeksi sebelumnya. Dalam situasi lain, deteksi langsung antigen dan deteksi antibodi tidak langsung saling melengkapi. Yang terakhir menunjukkan bahwa infeksi telah terjadi sebelumnya, sedangkan yang pertama memberikan informasi yang lebih tepat tentang status aktivitas patogen saat ini.
Anda dapat menemukan obat Anda di sini
➔ Obat untuk memperkuat pertahanan dan sistem kekebalan tubuhResiko, efek samping & bahaya
Dengan deteksi imunofluoresensi langsung, seperti semua bukti medis, ada dua risiko: risiko hasil positif palsu dan risiko hasil negatif palsu. Salah, hasil positif menyebabkan ketidaknyamanan psikologis dan stres berat bagi pasien.
Oleh karena itu, prosedur tes tambahan ditambahkan ke hasil yang positif, terutama jika diagnosis menyebabkan perubahan hidup yang drastis. Risiko dari hasil negatif yang salah adalah bahwa pasien tidak mengetahui tentang ancaman terhadap kesehatannya sendiri dan bahkan mungkin kesehatan masyarakat pada waktu yang tepat. Oleh karena itu, adalah baik untuk melakukan banyak penelitian dan membuat serta menawarkan sejumlah besar deteksi langsung imunofluoresensi berbeda yang siap untuk dijual. Bersama dengan metode deteksi langsung dan tidak langsung lainnya untuk penyakit dan patologi, ini meningkatkan akurasi diagnosis.
Deteksi langsung didasarkan pada konjugat antibodi, yang di satu sisi mengikat epitop antigen dan di sisi lain juga menyebabkan fluoresensi. Oleh karena itu, produk semacam itu hanya digunakan dalam satu jenis prosedur uji dan tidak digunakan untuk jenis prosedur uji lainnya.Ini adalah perbedaan prosedural penting dengan bukti tidak langsung, di mana antibodi fluoresen didahului oleh antibodi primer untuk pengikatan epitop. Oleh karena itu, konjugasi antibodi cocok untuk pengujian yang berbeda. Perbedaan prosedural ini berbeda dengan perbedaan medis antara deteksi antibodi tidak langsung dan deteksi langsung antigen.
