Diagnostik prapertilisasi

Itu Diagnostik prapertilisasi menawarkan kemungkinan pengujian genetik sel telur wanita sebagai bagian dari fertilisasi in vitro (IVF). Pemeriksaan dilakukan pada kromosom badan kutub ke-1 dan ke-2, yang muncul selama meiosis ke-1 dan ke-2 setelah sperma laki-laki masuk ke dalam sel telur. Keunggulan metode ini adalah jelas bukan merupakan diagnosis pra implantasi (PGD), karena pemeriksaan dilakukan sebelum nukleus betina dan jantan menyatu, sehingga diagnosis prapertilisasi diperbolehkan di beberapa negara yang melarang PGD.

Apa itu diagnostik prapertilisasi?

Diagnosis prapertilisasi memungkinkan untuk mendeteksi penyimpangan kromosom pada genom haploid sel telur wanita dalam konteks fertilisasi in vitro (IVF). Yang terpenting, penyimpangan numerik dari kromosom tertentu (aneuploidi) dan kelainan gen tertentu yang menyebabkan penyakit keturunan dapat dideteksi. Ketika sperma laki-laki dimasukkan ke dalam sitoplasma sel telur selama IVF, meiosis pertama dan kedua (meiosis I dan II) sel telur dipicu.

Pembelahan ini menciptakan dua sel "berlebihan", badan kutub, yang memiliki sekumpulan kromosom yang sama dengan sel telur itu sendiri. Badan kutub, yang biasanya akan dipecah oleh tubuh, diambil dengan biopsi badan kutub untuk memeriksa kromosom. Karena diagnosa prapertilisasi selalu dilakukan pada badan kutub, maka prosedur ini disebut juga dengan diagnosa badan kutub (PKD). Kelebihan metode pemeriksaan ini juga dapat dilakukan di beberapa negara yang melarang diagnosis pra implantasi (PGD), karena pemeriksaan dilakukan pada genom sel telur ketika inti sel dari sel sperma dan sel telur belum menyatu.

Kerugiannya adalah hanya penyimpangan kromosom dari genom ibu yang dapat diperiksa. Kromosom sperma yang telah dimasukkan ke dalam sitoplasma sel telur tidak dapat dideteksi dengan metode ini. Penyakit terkait Y tidak dapat dikenali karena rangkaian kromosom haploid sel telur tidak dapat mengandung kromosom Y.

Fungsi, efek & tujuan

Sebagai bagian dari diagnosis pra-pembuahan berupa pemeriksaan badan kutub genetik, anomali numerik (aneuploidi) dapat dideteksi pada kromosom tertentu dari genom ibu serta translokasi di mana segmen kromosom dipisahkan dan diintegrasikan kembali di tempat yang salah. Selain itu, mutasi gen terkait-X dapat didiagnosis yang diturunkan dari ibu dan didasarkan pada mutasi gen tunggal (penyakit monogenik). Ini mengasumsikan bahwa potensi penyakit keturunan harus diketahui agar dapat secara spesifik memeriksa gen tertentu pada kromosom X.

Dalam kasus pewarisan resesif, ada kemungkinan bahwa kromosom X dari badan kutub - dan juga kromosom X dari sel telur yang dibuahi, mengandung alel sehat dari gen yang sesuai. Prosedurnya sendiri termasuk biopsi badan kutub di mana dua badan kutub haploid dikeluarkan dari sel telur dan kromosomnya kemudian diuji FISH (hibridisasi fluoresensi in situ). Biopsi badan kutub merupakan tantangan besar bagi laboratorium yang melakukan pekerjaan karena identifikasi dan isolasi badan kutub memerlukan pengalaman yang cukup. Untuk prosedur uji FISH, yang disebut probe DNA tersedia untuk kromosom terpilih, yang terhubung ke kromosom haploid yang sesuai karena mereka memiliki urutan asam amino komplementer.

Probe DNA ditandai dengan warna fluoresen yang berbeda sehingga kromosom kemudian dapat diidentifikasi dengan bantuan perangkat lunak khusus dan dihitung dalam proses otomatis. Sebagian besar penyimpangan kromosom seperti aneuploidi dan pergeseran kromosom dalam kromosom bersifat mematikan. Ini berarti IVF tidak membentuk zigot, atau embrio ditolak setelah ditransplantasikan ke dalam rahim, atau keguguran dini atau lambat terjadi. Karena frekuensi penyimpangan kromosom dalam sel telur wanita meningkat seiring bertambahnya usia, tujuan penting dari diagnosis prapertilisasi adalah pemilihan positif dari sel telur yang telah dibuahi. Hanya telur yang dibuahi dengan - sejauh dapat dikenali - genom utuh yang ditransplantasikan kembali ke dalam rahim.

Seleksi positif dikatakan meningkatkan tingkat kehamilan setelah IVF dan mengurangi tingkat telur yang dibuahi yang ditolak dan jumlah keguguran. Tujuan lainnya adalah untuk menyingkirkan penyakit keturunan berdasarkan penyimpangan kromosom atau cacat genetik tertentu pada sel telur yang telah dibuahi kembali sejak awal dengan seleksi positif dari telur yang telah dibuahi. Penyakit keturunan khas yang dapat disingkirkan dengan tes ini adalah fibrosis kistik, atrofi otot tulang belakang, dan anemia sel sabit.

Resiko, efek samping & bahaya

Diagnosis prapertilisasi dilakukan di luar tubuh dan oleh karena itu tidak melibatkan risiko fisik tambahan bagi wanita yang bersangkutan. Hanya ada risiko rendah cedera fisik dan infeksi yang terkait dengan pengambilan telur. Berbeda dengan PGD yang juga mencakup pemeriksaan kromosom dengan menggunakan tes FISH, diagnosa pra pembuahan hanya dapat memeriksa kromosom dan materi genetik dari induknya.

Ini berarti bahwa tes IKAN negatif, di mana tidak ada kelainan kromosom atau genetik yang didiagnosis, dapat menimbulkan harapan yang terlalu positif pada orang tua mengenai perjalanan kehamilan dan kelahiran berikutnya. Penyimpangan kromosom dari genom ayah dan kemungkinan kelainan yang ada pada kromosom Y, yang dapat memicu penyakit keturunan terkait seks, tidak dicatat. Dalam hal ini, diagnostik prapertilisasi bahkan lebih tidak lengkap daripada PGD, di mana seluruh genom embrio pada tahap blastula dapat diperiksa.

Namun, bahkan dengan PGD negatif, tidak dapat dikesampingkan bahwa terdapat cacat genetik dalam genom embrio yang dapat menyebabkan perkembangan yang tidak diinginkan dan kemungkinan kerusakan setelah lahir. Tes FISH hanya dapat merujuk pada kromosom dan gen yang dipilih.